溶瘤病毒是天然的或經(jīng)人工改造的能選擇性在腫瘤組織中復(fù)制?增殖，從而殺傷腫瘤細(xì)胞，但對(duì)正常組織無(wú)殺傷作用的一類病毒。作為一種新的治療藥物，自問(wèn)世以來(lái)一直備受關(guān)注。2021年6月11日，溶瘤病毒G47Δ制劑Teserpaturev在全球首次獲批用于治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤(有條件及期限的批準(zhǔn))。

在第78屆日本消化外科學(xué)會(huì)的線上會(huì)議中，日本東京大學(xué)醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院胃?食道外科的菅原弘太郎醫(yī)生發(fā)表了演講。他表示，目前Teserpaturev(G47?)正在開展多癌種的臨床試驗(yàn)，其中活體外和小鼠模型中顯示對(duì)皮革胃癌有效。該研究成果可能會(huì)成為皮革胃癌治療的一種新的策略，并已經(jīng)發(fā)表于Mol TherOncolytics(2020; 17: 205-215)。

前列腺癌、惡性淋巴瘤、肝細(xì)胞癌也確認(rèn)有效

除直接殺傷腫瘤細(xì)胞外，溶瘤病毒可參與到抗腫瘤免疫的多個(gè)階段，發(fā)揮其抗腫瘤活性。溶瘤病毒可以誘導(dǎo)強(qiáng)力的免疫應(yīng)答，增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤反應(yīng)。被溶瘤病毒裂解的腫瘤細(xì)胞釋放大量腫瘤蛋白，這些蛋白可以被非特異性免疫細(xì)胞吞噬，而某些腫瘤特異性抗原可以被這些抗原呈遞細(xì)胞表達(dá)，并誘導(dǎo)T細(xì)胞攻擊未被感染的腫瘤細(xì)胞。

Teserpaturev(G47?)是一種具有人為三重變異的增殖型基因重組的單純皰疹病毒1型制劑(第三代腫瘤治療用的單純皰疹病毒1型)，只在癌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，而不會(huì)在正常細(xì)胞中增殖。在一項(xiàng)由醫(yī)生發(fā)起，驗(yàn)證對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤中惡性程度最高的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是否有效的II期臨床中，證實(shí)了Teserpaturev(G47?)的高有效性和安全性，成為了全球首款獲批治療惡性膠質(zhì)細(xì)胞瘤的溶瘤病毒產(chǎn)品。

而在其他癌種的前期研究中，Teserpaturev(G47?)也被確認(rèn)對(duì)前列腺癌、惡性淋巴瘤、肝細(xì)胞癌有效(Clin Cancer Res 2005; 11: 7886-7890、Mol Ther 2021; 29: 762-774、Mol Ther Oncolytics 2020; 18: 535-545)，除此之外，嗅神經(jīng)母細(xì)胞、惡性胸膜間皮瘤和惡性黑色素瘤的臨床試驗(yàn)也在進(jìn)行中。

Teserpaturev(G47?)對(duì)胃癌有效也已在多項(xiàng)臨床試驗(yàn)中得到證實(shí)，但迄今為止都不是以人為對(duì)象的臨床試驗(yàn)，也沒(méi)有皮革胃癌的相關(guān)報(bào)告。于是，菅原團(tuán)隊(duì)通過(guò)構(gòu)建專門的小鼠模型，首次證明了Teserpaturev(G47?)對(duì)皮革胃癌有效。

在皮革胃癌腹膜播種模型中，G47?抑制腫瘤增大，延長(zhǎng)生存期

菅原團(tuán)隊(duì)首先對(duì)包括皮革胃癌在內(nèi)的9種人體胃癌細(xì)胞株(MKN1、MKN45、MKN74、OCUM-1、Kato-Ⅲ、NUGC-4、44As3、HSC-39、HSC-60、后3種維皮革胃癌細(xì)胞株)進(jìn)行活體外試驗(yàn)，檢測(cè)G47?的細(xì)胞殺傷能力和病毒復(fù)制能力。G47?投入3天后，所有的細(xì)胞株經(jīng)過(guò)對(duì)比，細(xì)胞數(shù)量均明顯減少，觀察到強(qiáng)力的細(xì)胞殺傷能力和復(fù)制能力。

接下來(lái)，研究團(tuán)隊(duì)制作了包含皮革胃癌在內(nèi)的3種皮下腫瘤小鼠模型(MKN45、MKN74、44As3)。G47?注入腫瘤內(nèi)部后，所有的模型經(jīng)過(guò)對(duì)比分析，均發(fā)現(xiàn)了顯著的腫瘤抑制效果(所有P<0.01)，即使是體積在200mm3以上的巨大腫瘤也顯示出相同的效果。

此外，他們還進(jìn)一步制作了具有皮革胃癌的臨床特征，能夠可視化和定量化的腫瘤模型。在該模型中，隨著腹水和腹膜播種發(fā)生，很快導(dǎo)致了死亡。而在向腫瘤內(nèi)投入G47?后，腹膜播種的擴(kuò)散得到抑制，腫瘤增大得到了明顯的抑制，生存期顯著延長(zhǎng)(所有P<0.01)。

最后，研究團(tuán)隊(duì)把目光放在巨噬細(xì)胞上，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR) 來(lái)檢測(cè)G47?注入后腫瘤內(nèi)免疫反應(yīng)的變化。 給藥2天后，通過(guò)對(duì)腫瘤內(nèi)的免疫細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)G47?組M1型巨噬細(xì)胞比例顯著增加(P<0.05)，免疫抑制性的M2型巨噬細(xì)胞的比例顯著減少(P <0.001)，巨噬細(xì)胞呈兩極化改變。在PCR解析中，G47?組中M1相關(guān)基因CD86表達(dá)明顯增加(P <0.001)，M2相關(guān)基因Arg1及Mrc1的表達(dá)明顯減少(分別為P<0.01、P<0.05)。與流式細(xì)胞檢測(cè)一樣，PCR解析中巨噬細(xì)胞也呈現(xiàn)了明顯的兩極化改變。

菅原醫(yī)生表示，溶瘤病毒對(duì)已經(jīng)存在于腫瘤組織中的免疫細(xì)胞有強(qiáng)烈的刺激作用，能夠極大地改變腫瘤的微環(huán)境，使之從一個(gè)免疫抑制的環(huán)境變成免疫激活狀態(tài)

與免疫療法結(jié)合有望增強(qiáng)治療效果

最后，菅原醫(yī)生提到了免疫檢查點(diǎn)抑制劑(ICI)與Teserpaturev(G47?)的聯(lián)用。眾所周知，免疫檢查點(diǎn)抑制劑對(duì)于以腺癌為中心各種癌癥的適應(yīng)癥正在擴(kuò)大，其療效與腫瘤抗原和腫瘤內(nèi)CD8+T細(xì)胞、免疫抑制細(xì)胞的表達(dá)水平有關(guān)。在免疫應(yīng)答減弱的“冷”環(huán)境中，這種治療很難獲得療效。然而，G47?注入后可以將微環(huán)境改變成CD8+T細(xì)胞高表達(dá)的“熱”環(huán)境，G47?與免疫檢查點(diǎn)抑制劑的聯(lián)用是合理的。

事實(shí)上，他們?cè)谑彻馨┑男∈竽Ｐ椭羞M(jìn)行了G47?和ICI的聯(lián)合用藥研究，研究結(jié)果顯示近半數(shù)達(dá)到了完全緩解(CR)(Mol TherOncolytics, in press)。菅原醫(yī)生表示，在胃?食道領(lǐng)域，溶瘤病毒G47?與免疫治療的結(jié)合有望增加增強(qiáng)治療效果。此外，使用肝細(xì)胞癌小鼠模型的研究表明，射頻消融給予G47?治療可激活抗腫瘤免疫，預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)。

綜上所述，菅原醫(yī)生認(rèn)為溶瘤病毒Teserpaturev(G47?)已被證明對(duì)于晚期胃癌和皮革胃癌具有充分的有效性。對(duì)于今后的發(fā)展，他表示“在以人體為對(duì)象的臨床試驗(yàn)中，很有必要去研究G47?是如何實(shí)現(xiàn)免疫賦活效果”，并期望能進(jìn)一步擴(kuò)大藥物的適應(yīng)癥。